Avaliação do óleo ozonizado e da fotobiomodulação no tratamento nos efeitos locais provocados pelo veneno da serpente Bothrops Jararacussu
Data
2021
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Editor
Universidade Brasil
Resumo
O envenenamento da serpente Bothrops jararacussu (jararacuçu)(B.jararacussu)
causa efeitos locais, como dor, inchaço, inflamação, hemorragia e mionecrose.
OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização do óleo de girassol
ozonizado (OZO) associado ou não à fotobiomodulação (FBM) nos efeitos locais
promovidos pelo veneno de Bothrops jararacussu. MATERIAL E MÉTODOS: O
veneno de Bothrops jararacussu foi injetado no músculo gastrocnêmio direito (30
µg/50 µl NaCl 0,9%; i.m.) e os animais foram eutanasiados 3 e 24h após. O óleo foi
ozonizado utilizando gerador corona (Ozone & Life® Modelo R&L1,5RM) e a FBM
utilizada com os seguintes parâmetros: Thera Laser, DMC®, vermelho 685 nm, 4
J/cm2
, 100 mW, 0,3 cm2
, 1,2 J, 12 s, pontual. A FBM foi aplicada imediatamente após
a inoculação do veneno e o OZO também foi aplicado imediatamente após inoculação
do veneno embebido em gaze durante 15 minutos. Nos grupos controles, os animais
foram injetados com solução salina (NaCl 0,9%) e tratados com OZO ou FBM. Nos
grupos injetados com o veneno, os animais foram tratados com OZO e FBM aplicados
separadamente ou juntos. Os animais foram anestesiados, os músculos retirados,
enxaguados com PBS (solução tampão fosfato), fixados em Formaldeído a 10% por
3 a 24 h, processados pelas técnicas de rotina em histologia e corados com
Hematoxilina e Eosina. Os cortes histológicos foram analisados em microscópio de
luz e as células contadas e mensuradas utilizando o programa de imagem J. Foram
avaliadas células necrosadas e normais, realizada a análise quantitativa,
morfométrica, quantificado o edema celular através da medida da área e do peso dos
músculos e determinado os níveis da liberação de creatino kinase (CK). Os dados
foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey-Kramer (p< 0,05). RESULTADOS: Os
resultados mostraram que o veneno promove mionecrose das células musculares
caracterizado pelo edema e ruptura das células musculares. Promove edema
intracelular e liberação de CK devido a ruptura das membranas celulares. O
tratamento com a FBM e OZO aplicados separadamente, protege o músculo da ação
das toxinas do veneno, diminuindo o edema intracelular e diminuindo a liberação de
CK. O OZO aplicado isoladamente promoveu proteção melhor do que a FBM. A
associação da FBM com o OZO não promoveu efeito sinérgico nessa proteção.
CONCLUSÕES: Concluímos que devido aos efeitos benéficos verificados nesses
resultados, o OZO pode se tornar um tratamento adjuvante no envenenamento
promovido pela Bothrops jararacussu juntamente com o antiveneno, diminuindo os
efeitos lesivos locais. Essa melhora se deve aos efeitos terapêuticos do OZO.
Abstract
The poisoning of the Bothrops jararacussu (jararacuçu) snake (B.jararacussu) causes
local effects such as pain, swelling, inflammation, hemorrhage and myonecrosis.
OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the use of ozonized sunflower oil
(OZO) associated or not with photobiomodulation (FBM) in the local effects promoted
by Bothrops jararacussu venom. MATERIAL AND METHODS: Bothrops jararacussu
venom was injected into the right gastrocnemius muscle (30 µg/50 µl NaCl 0.9%; i.m.)
and the animals were euthanized 3 and 24 h later. The oil was ozonized using a corona
generator (Ozone & Life® Model R&L1.5RM) and the FBM was used with the following
parameters: Thera Laser, DMC®, red 685 nm, 4 J/cm2, 100 mW, 0.3 cm2, 1 .2 J, 12
s, spot. FBM was applied immediately after inoculation of the venom and OZO was
also applied immediately after inoculation of the venom soaked in gauze for 15
minutes. In the control groups, the animals were injected with saline solution (NaCl
0.9%) and treated with OZO or FBM. In the groups injected with the venom, the animals
were treated with OZO and FBM applied separately or together. The animals were
anesthetized, the muscles removed, rinsed with PBS (phosphate buffer solution), fixed
in 10% formaldehyde for 3 to 24 h, processed by routine histology techniques and
stained with Hematoxylin and Eosin. The histological sections were analyzed under a
light microscope and the cells counted and measured using the J imaging program.
Necrotic and normal cells were evaluated, quantitative and morphometric analysis was
performed, cellular edema was quantified by measuring the area and weight of the
muscles and determined the levels of creatine kinase (CK) release. Data were
submitted to ANOVA and Tukey-Kramer tests (p< 0.05). RESULTS: The results
showed that the venom promotes myonecrosis of muscle cells characterized by edema
and rupture of muscle cells. It promotes intracellular edema and CK release due to
disruption of cell membranes. Treatment with FBM and OZO, applied separately,
protects the muscle from the action of venom toxins, decreasing intracellular edema
and decreasing CK release. OZO applied alone provided better protection than FBM.
The association of FBM with OZO did not promote a synergistic effect in this protection.
CONCLUSIONS: We conclude that due to the beneficial effects observed in these
results, OZO can become an adjuvant treatment in poisoning. promoted by Bothrops
jararacussu together with the antivenom, reducing the local harmful effects. This
improvement is due to the therapeutic effects of OZO.
Descrição
Palavras-chave
Veneno de Bothrops jararacussu, Fotobiomodulação, Óleo Ozonizado de Girassol