Avaliação microbiológica da associação do biopolímero de fibrina com nitrato de prata

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dc.contributor.advisor-co1Nuñez, Silvia Cristina
dc.contributor.advisor1Cogo, José Carlos
dc.creatorCampos, Silvana
dc.date.accessioned2022-11-23T14:13:28Z
dc.date.available2022-11-23T14:13:28Z
dc.date.issued2021
dc.description.abstractFibrin sealants, also known as fibrin biopolymer (BPF), are biological matrixes from human plasma, fully resorbable, that mimic the last stages of the coagulation cascade during which fibrinogen is converted into a structured and insoluble fibrin clot. BPF developed from the snake venom Crotalus durissus terrificus, presents an excellent alternative for tissue engineering and cell modulation. Its use as a healer for venous ulcers in the lower limbs proved to be safe and potentially effective in a phase II clinical study. Objective: To investigate the antimicrobial effect of the association of fibrin biopolymer with silver nitrate. This association will allow its use in contaminated and colonized wounds, which currently leads to suspension of treatment with BPF. Methods: BPF is prepared from 2 active components and a diluent. Different concentrations of silver nitrate were mixed with the BPF components. The clots containing silver nitrate were inserted into the wells drilled on the agar in Petri dishes containing the culture medium of Mueller Hilton agar previously seeded with cultures of Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Silver nitrate concentrations were used, forming the following groups: Control - NP1 = 1mg / mL; NP2 = 2.5mg / mL and NP3 = 5mg / mL silver nitrate; Experimental group: the same concentrations used in the control group associated with BPF and positive control with antibiotics. The presence was verified and the inhibition halo present in each of the tested plates was measured. Tests of minimum inhibitory concentration (CIM) and minimum bactericide (CBM) were carried out to establish the lowest concentration of BPF + NP and NP capable of inhibiting the tested strains. Mean and median values of diameters with measures of central tendency and standard deviation and interquartile range were considered as measures of sample dispersion and verification of antimicrobial efficacy. Results: A significant difference was observed in the halos of inhibition of treatments with NP when compared with BPF + NP. There was a statistical difference in the inhibition halos of the gram-negative bacteria in relation to the gram-positive bacteria, in the treatment with NP, NP3 showed a significant difference in relation to NP2 compared to E. coli while S. aureus did not present a statistically significant difference. BPF alone did not form an inhibition halo. BPF + NP had an inhibitory effect on the antimicrobial action of NP by 18.2% for E. coli and 13.5% for S. aureus when compared to NP treatment. The CIM found for E. coli and S. aureus when tested with GMP + NP were 7.81 and 250 µg / mL and with NP 3.9 and 7.81 µg / mL. While CBM found for BPF + NP they were 15.62 and 1000 µg / mL and for treatment with NP 7.81 and 15.62 µg / mL respectively. Conclusion: It was possible to verify by the results that the NP and BPF + NP showed antibacterial effect on the species of gram-negative and grampositive bacteria, demonstrating greater efficacy for E. coli and that the antibacterial activity of the NP was more effective than the BPF + NP. He observed that GMP when isolated has no antibacterial effect.pt_BR
dc.description.resumoOs selantes de fibrina, também conhecidos como biopolímero de fibrina (BPF), são matrizes biológicas oriundas do plasma humano, totalmente reabsorvíveis, que mimetizam os últimos estágios da cascata de coagulação durante o qual o fibrinogênio é convertido em um coágulo de fibrina estruturado e insolúvel. O BPF desenvolvido a partir do veneno da serpente Crotalus durissus terrificus, apresenta uma excelente alternativa para a engenharia de tecidos e modulação celular. Seu uso como cicatrizante de úlceras venosas em membros inferiores mostrou-se seguro e com potencial eficácia em um estudo clínico de fase II. Objetivo: Investigar o efeito antimicrobiano da associação do biopolímero de fibrina com o nitrato de prata. Esta associação permitirá seu uso em feridas contaminados e colonizadas, o que atualmente leva a suspensão do tratamento com o BPF. Métodos: O BPF é preparado a partir de 2 componentes ativos e um diluente. Diferentes concentrações de nitrato de prata foram misturadas aos componentes do BPF. Os coágulos contendo o nitrato de prata foram inseridos nos poços perfurados no ágar em placas de Petri contendo meio de cultura ágar Mueller Hilton previamente semeadas com culturas de Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Foram utilizadas as concentrações de nitrato de prata formando os seguintes Grupos: Controle - NP1=1mg/mL; NP2= 2,5mg/mL e NP3= 5mg/mL de nitrato de prata; Grupo experimental: as mesmas concentrações utilizadas no Grupo controle associado ao BPF e controle positivo com antibióticos. Foi verificada a presença e mensurado o halo de inibição presente em cada uma das placas testadas. Foram realizados testes da concentração inibitória mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM) visando estabelecer a menor concentração do BPF+NP e NP capaz de inibir as cepas testadas. Foram considerados valores médios e medianos dos diâmetros com medidas de tendência central e desvio padrão e intervalo interquartil como medidas de dispersão das amostras e verificação da eficácia antimicrobiana. Resultados: Foi observada diferença significativa nos halos de inibição dos tratamentos com NP quando comparados com BPF+NP. Houve uma diferença estatística nos halos de inibição da bactéria gram-negativa em relação com a bactéria gram-positiva, no tratamento com NP, NP3 apresentou uma diferença significativa em relação a NP2 frente a E. coli enquanto S. aureus não apresentou diferença estatisticamente significativa. O BPF isolado não formou halo de inibição. BPF+NP teve um efeito inibitório da ação antimicrobiana do NP em 18,2% para E. coli e 13,5% para S. aureus quando comparado com o tratamento NP. A CIM encontrada para E. coli e S. aureus quando testada com BPF+NP foram 7,81 e 250 µg/mL e com NP 3,9 e 7,81 µg/mL. Enquanto CBM encontrada para BPF+NP foram de 15,62 e 1000 µg/mL e para o tratamento com NP de 7,81 e 15,62 µg/mL respectivamente. Conclusão: O BPF+NP e NP apresentaram efeito antibacteriano sobres as espécies de bactérias gram-negativas e gram-positivas, demonstrando maior eficácia para E. coli. Observou-se que BPF quando isolado não tem efeito antibacteriano e quando associado ano NP produz ação antibacteriana, mas o efeito é menor do que o promovido pelo NP.pt_BR
dc.formatPDFpt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorioacademico.universidadebrasil.edu.br/handle/123456789/256
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.publisherUniversidade Brasilpt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentInstituto Científico e Tecnológico da Universidade Brasilpt_BR
dc.publisher.initialsUBpt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Bioengenharia da Universidade Brasilpt_BR
dc.rightsopenAccesspt_BR
dc.subjectBiopolímero de fibrinapt_BR
dc.subjectNitrato de pratapt_BR
dc.subjectCrotalus durissus terrificuspt_BR
dc.subjectAntimicrobianopt_BR
dc.subjectSelante de fibrina heterólogopt_BR
dc.subject.cnpqCSpt_BR
dc.titleAvaliação microbiológica da associação do biopolímero de fibrina com nitrato de pratapt_BR
dc.typemasterThesispt_BR
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