Nanocompósitos à base de hidroxiapatita e nanotubos de carbono como reforço em biopolimero heterólogo de fibrina derivado do veneno de serpente para regeneração óssea
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Nanocompósitos à base de hidroxiapatita e nanotubos de carbono como reforço em biopolimero heterólogo de fibrina derivado do veneno de serpente para regeneração óssea
Abstract:O biopolímero de fibrina (BHF) desenvolvido a partir do veneno de Crotalus durissus
terrificus (cascavel) é um derivado heterólogo semelhante à trombina que converte
fibrinogênio em fibrina. É um produto natural, em forma de gel, biodegradável,
bioabsorvente, não tóxico e não imunogênico. Por outro lado, nanocompósitos de
hidroxiapatita (nHAp) e nanotubos de carbono (NTCs) apresentam bioatividade, não
são citotóxicos e possuem efeito bactericida. O objetivo do presente trabalho foi avaliar
a mistura de nHAp e NTCs com o BHF no processo de aceleração do reparo ósseo.
A produção dos nanocompósitos consistiu, primeiramente, na síntese dos NTCs de
múltiplas paredes, seguido de sua funcionalização ao plasma de O2 e purificação com
banho ácido. Com esse material pronto, produziu-se o compósito de nHAp com NTC.
Em seguida esse material foi adicionado no BHF derivado do veneno da serpente
Crotalus durissus terríficus (cascavel) e realizada a caracterização físico-química
desta mistura. As pastilhas formadas por essas misturas foram analisadas e
fotografadas em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Foram também testados
em cultura de células osteoblásticas para verificar a sua citotoxicidade. Para tal,
células da linhagem MC3T3-E1 foram cultivadas e verificados a viabilidade celular
utilizando as técnicas de AlamarBlue® e LIVE/DEAD® Viability/Cytotoxicity. Foi
realizada também experimentos em ratos induzindo o defeito ósseo em tíbias e
verificando a reparação óssea utilizando técnicas de histologia. Todos os dados foram
analisados por meio do teste de normalidade, sendo os resultados paramétricos
submetidos ao teste de variância two way ANOVA (tempo xs amostras)
complementado pelo pós-teste de Tukey a fim de verificar as diferenças estatísticas
entre grupos. Foi utilizado o software GraphPad Prism 5.01 (San Diego, CA, USA). Os
resultados foram apresentados como média desvio ± padrão (p≤0,05). Os resultados
mostraram que houve uma boa distribuição homogênea das misturas, não houve
mudança no pH e massa das amostras e que a mistura mais adequada para os testes
in vitro é a de BHF+nHAp com nanotubos de carbono 1 e 2%. A mistura não é
citotóxica para células da linhagem MC3T3-E1. O BHF assim como sua associação
com nHAp e NTCs promoveram o tecido ósseo neoformado na área da fratura,
mostrando potencial osteogênico em fraturas ósseas.
Subject:Crotalus dirissus terrificus.
Biopolímero de fibrina.
Nanocompósitos hidroxiapatita.
Nanotubulos de carbono.
Reparo ósseo